कसौटी

एंटीऑक्सिडेंट शक्ति की माप के लिए परीक्षण करें

ABTS निबंध

यह एक विश्लेषणात्मक विधि है जो एक नमूने की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता को निर्धारित करने के लिए स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक माप का उपयोग करता है। एक यूवी-विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग एबीटीएस + + कट्टरपंथी युक्त समाधान के अवशोषण को मापने के लिए किया जाता है, जो ABST के ऑक्सीकरण से उत्पन्न होता है (2, 2'-azinobis (3-एथिलबेनज़ोथियाज़ोलिन-6-सल्फोनेट), एक बेरंग पदार्थ जो कि रूप में होता है रेडिकलिका दृश्यमान श्रेणी में विशेषता तरंग दैर्ध्य को अवशोषित करके रंगीन होती है। एंटीऑक्सीडेंट अणुओं के अलावा ABTS • + समाधान, जो हाइड्रोजन और एक इलेक्ट्रॉन हस्तांतरण दोनों के माध्यम से कार्य कर सकता है, कट्टरपंथी की कमी को बेरंग रूप में निर्धारित करता है, प्रतिक्रिया मिश्रण के फलस्वरूप मलिनकिरण के साथ। यह मलिनकिरण, एंटीऑक्सिडेंट की वर्तमान की मात्रा के अनुपात में, एक विशिष्ट तरंगदैर्ध्य (734 एनएम) में एक निश्चित समय में अवशोषण में कमी के रूप में मापा जा सकता है। एंटीऑक्सिडेंट शक्ति की तुलना के साथ व्यक्त की जाती है। संदर्भ मानक के रूप में चुने गए एक एंटीऑक्सीडेंट अणु की ज्ञात मात्रा के लिए मापा जाने वाला शोषक मूल्य, जो आमतौर पर एस्कॉर्बिक एसिड या ट्रॉक्स (इस मामले में) है वहाँ TEAC Trolox समतुल्य एंटीऑक्सीडेंट क्षमता एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि) की बात है।

एबीटीएस के उपयोग के आधार पर एंटीऑक्सिडेंट पावर माप में सरल और तेज होने का लाभ है। इसके अलावा, यह एक विस्तृत पीएच रेंज में हाइड्रोफिलिक और लिपोफिलिक एंटीऑक्सिडेंट दोनों की माप की अनुमति देता है। हालांकि, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि प्रयुक्त कट्टरपंथी (ABTS • +) शारीरिक नहीं है और जैविक प्रणालियों में मौजूद नहीं है और इसमें शामिल विभिन्न एंटीऑक्सिडेंट्स की प्रतिक्रिया कैनेटीक्स के कारण माप की पुनरावृत्ति समस्याएं अक्सर उजागर होती हैं।

एफआरएपी (फेरिक एंटीऑक्सिडेंट पावर को कम करना)

FRAP परीक्षण आयरन आयनों के खिलाफ एंटीऑक्सिडेंट की कम करने की क्षमता को मापता है। यह इलेक्ट्रॉनों के हस्तांतरण पर आधारित एक विधि है, जिसमें लौह आयन Fe3 + से Fe2 + तक जाते हैं। पीएच (3.6) की कुछ शर्तों और TPTZ (2, 4, 6-tris (2-pyridyl) -s-triazine) की उपस्थिति में, ये आयन अलग-अलग विशेषताओं के साथ कॉम्प्लेक्स बनाते हैं, विशेष रूप से कम व्युत्पन्न (Fe2 +) -TPTZ) एक नीले रंग का रंग लेता है जिसमें 593 एनएम पर अधिकतम अवशोषण होता है जिसे स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जा सकता है। एक एंटीऑक्सिडेंट पदार्थ की कम करने की क्षमता को इसलिए एक मानक (जैसे एस्कॉर्बिक एसिड) के सापेक्ष भिन्नता के साथ तुलना के लिए स्थापित तरंग दैर्ध्य पर ऑक्सीडेंट युक्त समाधान के अवशोषण में भिन्नता के रूप में मापा जा सकता है।

FRAP परीक्षण को प्लाज्मा की कम करने की शक्ति को मापने के लिए डिज़ाइन किया गया था, लेकिन फिर शुद्ध यौगिकों और जटिल मैट्रिक्स की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का परीक्षण करने के लिए अनुकूलित किया गया था। वास्तव में, चूंकि यह विधि केवल इलेक्ट्रॉनों के हस्तांतरण के माध्यम से कम करने की क्षमता का मूल्यांकन करने की अनुमति देती है, हाइड्रोजन स्थानांतरण के माध्यम से कार्य करने वाले एंटीऑक्सिडेंट की कार्रवाई की पूरी तरह से अनदेखी करते हुए, यह अणुओं के योगदान को मापने की अनुमति नहीं देता है, जैसे कि thiols और प्रोटीन, जो एक एंटीऑक्सीडेंट की भूमिका निभाते हैं जैविक तरल पदार्थ (जैसे रक्त) में मौलिक। इस विधि का उपयोग करने में लाभ यह है कि यह इन विट्रो एंटीऑक्सिडेंट क्षमता का निर्धारण करने के लिए सबसे सरल, तेज और कम से कम महंगी विधियों में से एक है।

परीक्षण DPPH

2, 2-डिपेनहिल-1-पिक्रिलिड्राजाइल (DPPH •) एक बहुत ही स्थिर और व्यावसायिक रूप से उपलब्ध नाइट्रोजन रेडिकल है, जिसकी विशेषता एक तीव्र लाल-बैंगनी रंग है, जो एंटीऑक्सीडेंट क्षमता के साथ एक अणु की उपस्थिति में कम हो जाने पर कम हो जाती है। एंटीऑक्सिडेंट यौगिक के साथ प्रतिक्रिया के बाद DPPH समाधान के अवशोषण भिन्नता के 517 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक माप द्वारा, परीक्षण पदार्थ की कम करने की क्षमता को निर्धारित करना संभव है, चाहे वह हाइड्रोजन हस्तांतरण द्वारा या इलेक्ट्रॉन हस्तांतरण द्वारा कार्य करता हो। परिणाम आमतौर पर IC50 के रूप में व्यक्त किया जाता है, अर्थात् एंटीऑक्सिडेंट की मात्रा डीपीपीएच की प्रारंभिक एकाग्रता 50% तक कम करने में सक्षम है।

यह एक त्वरित, सरल और किफायती तरीका है। इस विश्लेषणात्मक तकनीक की सीमाएं इस संभावना से दी जाती हैं कि विश्लेषण के परिणाम उस स्थिति में गलत साबित हो जाते हैं जिसमें परीक्षण अणु उसी तरंग दैर्ध्य रेंज में अवशोषित होते हैं जैसे कि डीपीपीएच कट्टरपंथी या बड़े अणुओं की मौजूदगी में स्टेरलाइज किए गए हैं जो नहीं करते हैं वे जड़ के प्रतिक्रियाशील भाग के साथ प्रतिक्रिया करते हैं। यह निर्धारित करता है कि डीपीपीएच एंटीऑक्सिडेंट के साथ पेरोक्सिल रेडिकल की तुलना में 1000 गुना धीमी गति से प्रतिक्रिया करता है।

पीसीएल टेस्ट (फोटोकैमिलुमिनसेंस)

पीसीएल परीक्षण एक विशिष्ट कट्टरपंथी प्रजातियों, सुपरऑक्साइड ऑयन (O2 • -) की प्रतिक्रिया पर आधारित है, जो कि यूवी विकिरण द्वारा फोटोकैमिक रूप से उत्पन्न होता है, जिसमें किमिलिलिनेसेंस उत्सर्जित करने में सक्षम यौगिक होता है। उपयोग किया जाने वाला मार्कर ल्यूमिनोल है, एक अणु है जो मुक्त कणों द्वारा ऑक्सीकृत होने पर एक प्रकाश का उत्सर्जन करता है जिसे एक विशेष उपकरण (फोटोकैम®) का उपयोग करके मापा जा सकता है। राशन मिश्रण में एंटीऑक्सीडेंट की मौजूदगी रसायनयुक्त प्रजातियों को रासायनिक संदीप्ति के उत्सर्जन को रोककर निष्क्रिय कर देती है। पीसीएल विश्लेषण बहुत तेजी से और संवेदनशील है। इसके अलावा, ACW (एंटीऑक्सिडेंट क्षमता पानी में घुलनशील) और ACL (एंटीऑक्सिडेंट क्षमता लिपिड घुलनशील) नामक दो अलग-अलग विश्लेषणात्मक प्रोटोकॉल के आवेदन के साथ, एक ही यौगिक के लिए दोनों पानी में घुलनशील घटक (फ्लेवोनोइड्स, विटामिन) की कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता में योगदान को मापा जा सकता है। सी, अमीनो एसिड, आदि) जो कि लिपोसेलेबल एक (टोकोफेरोल, टोकोट्रिऑनोल, कैरोटीनॉइड्स, आदि) है। मानक संदर्भ अणुओं के सापेक्ष माप के साथ दर्ज किए गए मूल्यों की तुलना के लिए, एसीएल प्रोटोकॉल के लिए एस्कॉर्बिक एसिड और एसीडब्ल्यू प्रोटोकॉल के लिए ट्रोक्स, परीक्षण उत्पाद की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता प्राप्त की जाती है।